Prevalence of Ehrlichia canis and Hepatozoon canis in sheltered dogs in southern Aburrá Valley, Colombia

Background: Bacteria of the Anaplasmataceae family and canine hemoparasitic protozoans transmitted by ticks are common in Colombia due to circulation and biological adaptation of vector Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.). Objective: To detect the circulation of Ehrlichia canis and Hepatozoon canis in sheltered dogs in three municipalities in southern Aburrá Valley, province of Antioquia, Colombia. Methods: Primers were used to amplify the 16S rRNA associated with the Anaplasmataceae family, dsb for Ehrlichia sp. and 18S rRNA for Hepatozoon sp. Results: Of the 357 samples of venous blood obtained, representing all the sheltered dogs in the study zone, Ehrlichia canis DNA was detected in 2.2% of individuals, showing identity of 100% with previous sequences from the GenBank. Hepatozoon canis showed 8.7% (31/357) prevalence of infection, with 100% identity to genotypes from Japan, Brazil, and Spain. Only one sequence of H. canis exhibited a phylogenic divergence concerning H. canis previously reported in Brazil and the Old World. Conclusions: This study confirms the circulation of E. canis and H. canis in asymptomatic shelter dogs in the south-central zone of the Aburrá Valley, province of Antioquia, Colombia. The present study is the first molecular detection of H. canis in the Province of Antioquia and the third report of canine hepatozoonosis from Colombia, highlighting the importance of considering this agent in veterinary clinic.

Antecedentes: Los agentes patógenos transmitidos por garrapatas, tales como las bacterias de la familia Anaplasmataceae y los protozoos hemoparasitarios caninos, son comunes en Colombia debido a la circulación y la adaptación biológica del vector Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.). Objetivo: Detectar la circulación de Ehrlichia canis y Hepatozoon canis en perros protegidos en tres municipios del sur del Valle de Aburrá, departamento de Antioquia, Colombia. Métodos: Se usaron cebadores para amplificar el gen 16S rRNA asociado con la familia Anaplasmataceae y el gen dsb para Ehrlichia sp. y el 18S rRNA para Hepatozoon sp. Resultados: De las 357 muestras de sangre venosa obtenidas, que representan a todos los perros de albergues en la zona de estudio, 2,2% fueron positivas para Ehrlichia canis, con 100% de identidad con secuencias anteriores publicadas en todo el mundo. Hepatozoon canis mostró una prevalencia de infección del 8,7% (31/357), con una identidad del 100% con genotipos de Japón, Brasil y España. Solo una secuencia de H. canis exhibió divergencia filogénica en relación con H. canis previamente reportada en Brasil y el Viejo Mundo. Conclusiones: Este estudio confirma la circulación de E. canis y H. canis en perros asintomáticos de albergues en la zona centro-sur del Valle de Aburrá, departamento de Antioquia, Colombia. El presente estudio es la primera detección molecular en el Departamento de Antioquia y el tercer reporte de hepatozoonosis canina de Colombia destacando la importancia de considerar este agente en la clínica veterinaria.

Antecedentes: Agentes patogênicos transmitidos por carrapatos, como bactérias da família Anaplasmataceae e protozoários hemoparasitários caninos, são comuns na Colômbia devido à circulação e adaptação biológica do vetor Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.). Objetivo: Detectar Ehrlichia canis e Hepatozoon canis em cães abrigados em três municípios do sul do vale de Aburrá, departamento de Antioquia, Colômbia. Métodos: Os primers foram utilizados para amplificar o rRNA 16S associado à família Anaplasmataceae, o dsb para Ehrlichia sp. e o rRNA 18S para Hepatozoon sp. Resultados: Das 357 amostras de sangue venoso obtidas, representando todos os cães abrigados na zona de estudo, 2,2% foram positivas para Ehrlichia canis, com 100% de identidade com sequências anteriores publicadas em todo o mundo. Hepatozoon canis mostrou uma prevalência de infecção de 8,7% (31/357), com 100% de identidade com genótipos do Japão, Brasil e Espanha. Apenas uma sequência de H. canis apresentou divergência filogênica em relação a H. canis previamente relatados no Brasil e no Velho Mundo. Conclusões: Este estudo confirma a circulação de E. canis e H. canis em cães de abrigo assintomáticos na zona centro-sul do vale de Aburrá, departamento de Antioquia, Colômbia. O presente estudo é a primeira detecção molecular no Departamento de Antioquia e o terceiro relato de hepatozoonose canina na Colômbia, destacando a importância de considerar este agente na clínica veterinária.

Ocorrência de Babesia sp, Ehrlichia canis e Hepatozoon canis em cães domiciliados, em dois municípios do estado do Espírito Santo - Brasil / Occurrence of Babesia sp, Ehrlichia canis and Hepatozoon canis in domiciled dogs in two municipalities of the state of Espírito Santo - Brazil / Ocurrencia de Babesia sp, Ehrlichia canis y Hepatozoon canis em perros domiciliados em dos municipios del estado de Espírito Santo - Brasil

As doenças transmitidas por carrapatos são afecções de grande importância na clínica médica de pequenos animais, devido à alta casuística e ampla distribuição vetorial no território brasileiro. Os principais agentes responsáveis pelas infecções em cães são Babesia sp., Ehrlichia canis e Hepatozoon canis. Os animais infectados são assintomáticos ou apresentam sinais clínicos inespecíficos, sendo necessário a utilização de testes diagnósticos para definição do agente etiológico, e diagnóstico seguro. O objetivo do presente estudo foi determinar a ocorrência desses micro-organismos em cães naturalmente infectados, domiciliados nos municípios de Vila Velha e Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes testes de detecção: Reação em cadeia polimerase (PCR), sorologia para detecção de anticorpos anti Ehrlichia canis e pesquisa de hematozoários em esfregaço sanguíneo. Foram analisadas 65 amostras de sangue obtidas por venopunção de veia cefálica de cães. No teste de PCR, 4,62% dos animais foram positivos para Babesia vogeli e 1,54% para Ehrlichia canis sendo os resultados para Hepatozoon canis negativos. No teste sorológico para E. canis 90,77% dos animais foram positivos para a presença de anticorpos, e na pesquisa em lâminas de esfregaço sanguíneo 3,02% apresentavam outros hemoparasitas. Os resultados indicam a dispersão desses hemoparasitas na população canina da região de estudo, entretanto com baixa ocorrência. O teste de PCR demonstrou-se como o mais sensível no qual Babesia vogeli foi o agente mais observado.(AU)

Tick-borne diseases are diseases of great importance in the medical practice of small animals, due to the high casuistry and wide vectorial distribution in the Brazilian territory. The main agents responsible for infections in dogs are Babesia sp., Ehrlichia canis and Hepatozoon canis. Infected animals are asymptomatic or present nonspecific clinical signs, requiring the use of diagnostic tests to define the etiologic agent, and safe diagnosis. The objective of the present study was to determine the occurrence of these microorganisms in naturally infected dogs domiciled in the municipalities of Vila Velha and Anchieta, Espírito Santo, using different detection tests: polymerase chain reaction (PCR), serology to detect antibodies against Ehrlichia canis and research of hematozoa in blood smears. Sixty-five blood samples obtained by venipuncture of the cephalic vein of dogs were analyzed. In the PCR test, 4.62% of the animals were positive for Babesia vogeli and 1.54% for Ehrlichia canis, and the results for Hepatozoon canis were negative. In the serological test for E. canis, 90.77% of the animals were positive for the presence of antibodies, and in the research in blood smear slides, 3.02% presented other hemoparasites. The results indicate the dispersion of these hemoparasites in the canine population of the study region, however with low occurrence. The PCR test proved to be the most sensitive, in which Babesia vogeli was the most observed agent.(AU)

Las enfermedades transmitidas por garrapatas son enfermedades de gran importancia en la práctica médica de los pequeños animales, debido a la alta casuística y amplia distribución vectorial en el territorio brasileño. Los principales agentes responsables de las infecciones en los perros son Babesia sp., Ehrlichia canis y Hepatozoon canis. Los animales infectados son asintomáticos o presentan signos clínicos inespecíficos, siendo necesario el uso de pruebas diagnósticas para la definición del agente etiológico, y el diagnóstico seguro. El objetivo del presente estudio fue determinar la ocurrencia de estos microorganismos en perros infectados naturalmente, domiciliados en los municipios de Vila Velha y Anchieta, Espírito Santo, utilizando diferentes pruebas de detección: reacción en cadena de la polimerasa (PCR), serología para detectar anticuerpos anti Ehrlichia canis e investigación de hematozoos en frotis de sangre. Se analizaron sesenta y cinco muestras de sangre obtenidas por venopunción de la vena cefálica de los perros. En la prueba PCR, el 4,62% de los animales fueron positivos para Babesia vogeli y el 1,54% para Ehrlichia canis, y los resultados para Hepatozoon canis fueron negativos. En la prueba serológica para E. canis, el 90,77% de los animales fueron positivos a la presencia de anticuerpos, y en la investigación en láminas de frotis de sangre el 3,02% presentaron otros hemoparásitos. Los resultados indican la dispersión de estos hemoparásitos en la población canina de la región de estudio, aunque con una baja presencia. La prueba PCR resultó ser la más sensible, en la que Babesia vogeli fue el agente más observado.(AU)

Occurrence of tick-borne pathogens in dogs in a coastal region of the state of Ceará, northeastern Brazil / Ocorrência de patógenos transmitidos por carrapatos em cães em uma região litorânea do estado do Ceará, nordeste do Brasil

Abstract The aim of this study was to determine the occurrence of tick-borne pathogens (Ehrlichia canis, Babesia vogeli, Hepatozoon spp. and Rickettsia spp.) in dogs in Vila de Jericoacoara, coastal region of Ceará, Brazil. Blood samples were collected from 153 animals and analyzed using molecular and serological methods. Sixty animals were found to be infected or exposed to at least one of the pathogens studied. Babesia vogeli was the most prevalent pathogen (15%), followed by E. canis (13.7%) and Hepatozoon spp. (11.8%), which was identified as Hepatozoon canis through sequencing. Twenty dogs (13%) were seroreactive to Rickettsia spp. Rhipicephalus sanguineus sensu lato was observed on 11.8% of the animals. There were associations between age (< 3 years old) and positivity for B. vogeli, and between habitation (stray dogs) and positivity for H. canis. There were also associations between anemia and infection with H. canis, and between leukopenia and exposure to Rickettsia spp. No association was detected between clinical alterations and infection with or exposure to the pathogens studied. The results confirmed that pathogens of veterinary importance are circulating in northeastern Brazil and showed that dogs are exposed to Rickettsia species with zoonotic potential, thus indicating a need for vector control measures.

Resumo O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de patógenos transmitidos por carrapatos (Ehrlichia canis, Babesia vogeli, Hepatozoon spp. e Rickettsia spp.) em cães na Vila de Jericoacoara, região costeira do Ceará, Brasil. Amostras de sangue foram coletadas de 153 animais e analisadas por métodos moleculares e sorológicos. Sessenta animais foram encontrados infectados ou expostos a pelo menos a um dos patógenos estudados. Babesia vogeli foi o patógeno mais prevalente (15%), seguido por E. canis (13,7%) e Hepatozoon spp. (11,8%), que foi identificado como Hepatozoon canis por sequenciamento. Vinte cães (13%) foram sororreativos à Rickettsia spp. Rhipicephalus sanguineus sensu lato foi observado em 11,8% dos animais. Houve associações entre idade (<3 anos) e positividade para B. vogeli, e entre habitação (cães de rua) e positividade para H. canis. Também houve associações entre anemia e infecção por H. canis, e entre leucopenia e exposição a Rickettsia spp. Não foi detectada associação entre alterações clínicas e infecção ou exposição aos patógenos estudados. Os resultados confirmaram que patógenos de importância veterinária estão circulando no nordeste do Brasil e mostraram que cães estão expostos a espécies de Rickettsia com potencial zoonótico, indicando a necessidade de medidas de controle do vetor.

Post mortem protozoan hemoparasites detection in wild mammals from Mato Grosso state, Midwestern Brazil / Detecção post mortem de hemoparasitas protozoários em mamíferos selvagens do estado de Mato Grosso, Centro-Oeste do Brasil

Abstract To a better insight into the epidemiology and genetic diversity of protozoan hemoparasites infections in wild mammals, this study aimed to the post mortem detection of DNA from species of the order Piroplasmida (Babesia sp., Cytauxzoon sp., and Theileria sp.) and suborder Adelorina (Hepatozoon sp.) using polymerase chain reaction based on the 18S rRNA gene followed by genetic sequencing of blood and spleen samples collected from carcasses of 164 free-ranging and captive wild mammals from Mato Grosso state. Among them, one Leopardus pardalis, three Panthera onca, two Puma concolor were positive for Cytauxzoon sp., and six Tapirus terrestris tested positive for Piroplasmida, while one L. pardalis was positive for Hepatozoon sp. Furthermore, an uncharacterized piroplasmid genetically related to Theileria sp. previously detected in cats from Brazil was described in lowland tapirs. Despite the controversy regarding the epidemiological threat of these protozoa, the detection of these tick-borne agents in wild free-living and captive mammals, even when asymptomatic, demonstrates the importance of monitoring, particularly in hotspots such as the state of Mato Grosso, to verify the circulation and genetic diversity, to anticipate the possible emergence of diseases, and even their consequences to other animals as well as humans.

Resumo Para uma melhor compreensão da epidemiologia e diversidade genética das infecções por hemoprotozoários em mamíferos selvagens, este estudo teve como objetivo a detecção post mortem de DNA de espécies da ordem Piroplasmida (Babesia sp., Cytauxzoon sp. e Theileria sp.) e subordem Adelorina (Hepatozoon sp.), utilizando-se a reação em cadeia pela polimerase, baseada no gene 18S rRNA, seguido de sequenciamento genético de amostras de sangue e baço, coletadas de 164 carcaças de mamíferos selvagens de vida livre e cativos do estado de Mato Grosso. Entre eles, um Leopardus pardalis, três Panthera onca, dois Puma concolor foram positivos para Cytauxzoon sp., e seis Tapirus terrestris testaram positivos para Piroplasmida, enquanto um L. pardalis foi positivo para Hepatozoon sp. Além disso, foi descrito em antas, um piroplasmídeo não caracterizado geneticamente, relacionado à Theileria sp., previamente detectado em gatos do Brasil. Apesar da controvérsia quanto à ameaça epidemiológica desses protozoários, a detecção desses agentes em mamíferos silvestres e cativos, mesmo quando assintomáticos, demonstra a importância do monitoramento, principalmente em hotspots, como no estado de Mato Grosso, para verificar a circulação e a diversidade genética, a fim de antecipar o possível surgimento de doenças e, até mesmo, suas consequências para outros animais, bem como os humanos.

Molecular detection of Babesia canis vogeli and Hepatozoon canis in dogs in the department of Magdalena (Colombia) / Detección molecular de Babesia canis vogeli y Hepatozoon canis en perros en el departamento del Magdalena (Colombia)

ABSTRACT The canine population in the cities of Ciénaga and Santa Marta has been estimated at 54,953 based on individual dogs with owners. Due to the role that dogs play in society, either as pets or as transmitters of zoonoses to humans, we conducted a study with 169 blood samples from dogs that visited two veterinary clinics in these locations between March and September of 2017. The objective of the study was to detect species of Babesia and Hepatozoon canis by amplifying the 18S gene using conventional polymerase chain reaction (PCRc). The presence of Babesia sp. and Hepatozoon canis was detected in 15 (8.87%) and 12 (7.10%) DNA samples, respectively. In addition, 7 (4.14%) cases of coinfection were recorded. The Babesia sp. sequences obtained corresponded to the B. canis vogeli subspecies. This both pathogens in the Colombian Caribbean region and cases of coinfection in Colombian dogs. Therefore, the national veterinary community is encouraged to consider the information presented here in their differential diagnoses associated with companion vector-borne diseases (CVBDs). This information will allow veterinary professionals to create control and prevention strategies to prevent the spread of these infections.

RESUMEN La población canina en las ciudades de Ciénaga y Santa Marta se ha estimado en 54.953 individuos con propietarios. Debido al rol que desempeñan los perros en la sociedad, ya sea como animales de compañía o como transmisores de zoonosis al humano, se realizó un estudio con 169 muestras sanguíneas de perros que visitaron dos clínicas veterinarias en estas localidades entre marzo y septiembre del año 2017. El objetivo del estudió consistió en detectar especies de Babesia y Hepatozoon canis amplificando el gen 18S mediante reacción en cadena de la polimerasa convencional (PCR-c). La presencia de Babesia sp. y Hepatozoon canis se detectó en 15 (8,87%) y 12 (7,10%) muestras de ADN, respectivamente. Además, se registraron 7 (4,14%) casos de coinfección. Las secuencias obtenidas de Babesia sp. correspondieron a la subespecie B. canis vogeli. Se presentan ambos patógenos para la región Caribe colombiana y casos de coinfección en perros de Colombia. Por lo tanto, se exhorta a la comunidad veterinaria nacional a considerar la información presentada en sus diagnósticos diferenciales asociados a las enfermedades transmitidas por vectores de compañía (CVBDs). Esta información permitirá a los profesionales veterinarios crear estrategias de control y prevención para mitigar la propagación de estas infecciones.

Molecular survey of tick-borne pathogens in small mammals from Brazilian Amazonia / Levantamento molecular de patógenos transmitidos por carrapatos em pequenos mamíferos da Amazônia brasileira

Abstract Small non-volant mammals (marsupials and small rodents) were captured at three different timepoints from 23 forest fragments across three municipalities (Alta Floresta, Sinop and Cláudia) covering the Amazonian biome of the Mato Grosso State in Midwestern Brazil. The animal tissues (liver and spleen) and blood were screened using molecular tools for the detection of Babesia, Coxiella, Cytauxzoon, Hepatozoon, Theileria, and Anaplasmataceae agents. A total of 230 specimens (78 rodents and 152 marsupials) were trapped. Hepatozoon and Piroplasmorida agents were detected in the common opossums (Didelphis marsupialis). In turn, all samples (blood, liver, or spleen) collected from the small mammals were negative for the genus Coxiella and the family Anaplasmataceae, as detected by polymerase chain reaction (PCR). Phylogenetic analyses inferred from partial sequences of the 18S rRNA gene highlighted the occurrence of new Hepatozoon and Piroplasmorida haplotypes. Future studies determining the role of common opossum (D. marsupialis) in the epidemiological cycles of Hepatozoon and Babesia under natural conditions in the Amazonian biome are necessary.

Resumo Pequenos mamíferos não voadores (marsupiais e pequenos roedores) foram capturados em três diferentes períodos, ao longo de 23 fragmentos florestais de três municípios (Alta Floresta, Sinop e Cláudia), localizados no bioma amazônico do Estado de Mato Grosso, no centro-oeste do Brasil. Os tecidos dos animais (fígado e baço) e sangue foram selecionados e submetidos a ensaios moleculares para a detecção do DNA de Babesia, Coxiella, Cytauxzoon, Hepatozoon, Theileria e agentes Anaplasmataceae. Um total de 230 espécimes (78 roedores e 152 marsupiais) foram capturados. Hepatozoon e agentes Piroplasmorida foram detectados em gambás (Didelphis marsupialis). Ao contrário, todas as amostras (sangue, fígado ou baço) coletadas dos pequenos mamíferos foram negativas para o gênero Coxiella e a família Anaplasmataceae, conforme detectado pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Análises filogenéticas inferidas pelas sequências parciais do gene 18S rRNA evidenciaram a ocorrência de novos haplótipos de Hepatozoon e Piroplasmorida. Futuros estudos determinando a importância do gambá-comun (D. marsupialis) nos ciclos epidemiológicos de Hepatozoon e Babesia em condições naturais, no bioma amazônico, são necessários.

Molecular detection of vector borne pathogens in anemic and thrombocytopenic dogs in southern Brazil / Detecção molecular de patógenos transmitidos por vetores em cães anemicos e trombocitopenicos no Sul do Brasil

Abstract Arthropod-borne pathogens are medically important because of their ability to cause diseases in their hosts. The purpose of this study was to detect the occurrence of Ehrlichia spp., piroplasmids and Hepatozoon spp. in dogs with anemia and thrombocytopenia in southern Brazil. EDTA-whole blood was collected from 75 domestic dogs presenting anemia or/and thrombocytopenia from Guarapuava, state of Paraná, Brazil. DNA samples were subjected to conventional PCR assays for Ehrlichia spp. (dsb), piroplasmids (18S rRNA) and Hepatozoon spp. (18S rRNA), followed by sequencing and phylogenetic analyses. Among the 75 dogs, one (1.33%) was positive for Hepatozoon sp. and six (8%) were positive for piroplasmids in 18S rRNA cPCR assays. None of the dogs showed positive results in Ehrlichia spp.-cPCR targeting dsb gene. The phylogenetic analyses revealed that three piroplasm sequences were clustered with Rangellia vitalii, while one sequence was grouped with B. vogeli. The only sequence obtained from Hepatozoon spp.-PCR protocol was pooled with H. canis. Therefore, there is urgent need for differential molecular diagnosis of the two piroplasm species cited as etiological agents in clinical cases of canine hemoparasitic diseases, given the higher pathogenic potential of R. vitalii than of B. vogeli.

Resumo Agentes transmitidos por artrópodes têm grande importância na medicina veterinária devido à sua capacidade de causar doenças graves em seus hospedeiros. O presente estudo objetivou investigar a ocorrência de três patógenos transmitidos por vetores, Ehrlichia canis, Rangelia vitalii e Hepatozoon canis, em cães na região sul do Brasil. Foram coletadas amostras de sangue total de 75 cães domésticos que apresentavam anemia e/ou trombocitopenia, em Guarapuava, Paraná, Brasil. As amostras de DNA foram submetidas à técnica de PCR convencional para E. canis (dsb), piroplasmídeos (18S rRNA) e Hepatozoon spp. (18S rRNA), seguida de sequenciamento e análises filogenéticas. Das 75 amostras, uma (1,33%) foi positiva para Hepatozoon spp. e seis (8%) foram positivas para Babesia spp. Nenhuma amostra mostrou resultados positivos para Ehrlichia spp. utilizando a detecção pelo gene dsb. As análises filogenéticas revelaram que três sequências obtidas foram agrupadas no mesmo clado que R. vitalii , enquanto uma foi agrupada juntamente com B. vogeli. A única sequência obtida pelo protocolo de PCR para Hepatozoon spp. foi agrupada juntamente com H. canis. Assim, é justificada necessidade de diferenciação das espécies de piroplasmas, através do diagnóstico molecular, como agentes etiológicos nos casos clínicos de hemoparasitose canina, considerando o potencial patogênico de R. vitalii quando comparado à B. vogeli.

Hepatozoon caimani in Caiman crocodilus yacare (Crocodylia, Alligatoridae) from North Pantanal, Brazil / Hepatozoon caimani em Caiman crocodilus yacare (Crocodylia, Alligatoridae) do Norte do Pantanal, Brasil

Abstract Hepatozoon species are the most common intracellular hemoparasite found in reptiles. Hepatozoon caimani, whose vectors are Culex mosquitoes, has been detected in a high prevalence among caimans in Brazil by blood smears examinations. The present work aimed to detect and characterize the Hepatozoon spp. found in 33 caimans (24 free-ranging and 9 captive; 28 males and 5 females) (Caiman crocodilus yacare) sampled at Poconé, North Pantanal, state of Mato Grosso, Brazil, using blood smears examinations and molecular techniques. Hepatozoon spp.-gametocytes were found in 70.8% (17/24) and 88.8% (8/9) of blood smears from free-ranging and captive caimans, respectively. Hepatozoon spp. 18S rRNA DNA was found in 79.2% (19/24) and 88.8% (8/9) of free-ranging and captive caimans, respectively. Comparative analysis of parasitized and non-parasitized erythrocytes showed that all analyzed features were significantly different (P<0.05) for both linear and area dimensions. Phylogenetic analysis based on 18S rRNA sequences grouped the Hepatozoon spp. sequences detected in the present study together with H. caimani, recently detected in caimans in southern Pantanal.

Resumo Espécies do gênero Hepatozoon são os hemoparasitas intracelulares mais comumente encontrados em répteis. Hepatozoon caimani, cujos vetores são mosquitos do gênero Culex sp., têm sido detectados em uma alta prevalência entre jacarés no Brasil, por meio da análise de esfregaços sanguíneos. O presente estudo objetivou detectar e caracterizar parasitas do gênero Hepatozoon spp. em 33 jacarés (24 de vida-livre e 9 de cativeiro; 28 machos e 5 fêmeas) (Caiman crocodilus yacare) amostrados em Poconé, região norte do Pantanal, estado do Mato Grosso, Brasil, por meio da análise de esfregaços sanguíneos e técnicas moleculares. Gametócitos de Hepatozoon spp. foram encontrados em 70,8% (17/24) e em 88,8% (8/9) dos esfregaços sanguíneos de jacarés de via-livre e cativeiro, respectivamente. 18S rRNA DNA de Hepatozoon spp. foi detectado em 79,2% (19/24) e 88,8% (8/9) das amostras de sangue de jacarés de vida-livre e cativeiro, respectivamente. A análise comparativa de eritrócitos parasitados e não parasitados mostrou diferença significativa (P<0,05) em todas as variáveis lineares e de área analisadas. A análise filogenética baseada em sequências de DNA do 18S rRNA agrupou as sequências de Hepatozoon spp. detectadas no presente estudo juntamente com aquelas de H. caimani, recentemente detectadas em jacarés do Pantanal do Mato Grosso do Sul.

Detección molecular y análisis filogenético de Hepatozoon canis (Eucoccidiorida: Haemogregarinidae) en perros clínicamente sanos de Bahía Blanca (Buenos Aires)

Las enfermedades caninas causadas por protozoarios y transmitidas por garrapatas representan un importante problema en medicina veterinaria. El objetivo del estudio fue detectar molecularmente Hepatozoon spp., Babesia spp. y Theileria spp. en perros clínicamente sanos de distintas regiones de Argentina y analizar la diversidad genética de los hallazgos obtenidos. Se analizaron 163 muestras de ADN de sangre de perros (40 de Ciudad Autónoma de Buenos Aires; 33 de Bahía Blanca, Buenos Aires; 15 de Castelli, Chaco; 27 de Salsipuedes, Córdoba; 40 de Merlo, San Luis; y 8 de San Miguel, Corrientes). Mediante una PCR que amplifica un fragmento variable (460-540 pb) del gen ARNr 18S incluyendo la región V4 de los géneros Hepatozoon, Babesia y Theileria, el 12,1 % (4/33) de los perros de Bahía Blanca (Buenos Aires) resultaron positivos. Las secuencias obtenidas se identificaron como Hepatozoon canis y resultaron filogenéticamente similares a hallazgos en Sudamérica y en el resto del mundo. El estudio de H. canis en Argentina mediante técnicas moleculares de diagnóstico junto con el análisis filogenético resulta de suma importancia para conocer la situación de este patógeno en el país.

Tick-borne protozoan canine diseases represent a major problem in veterinary medicine. The aim of the study was to detect molecularly Hepatozoon spp., Babesia spp. and Theileria spp. in clinically healthy dogs from different regions of Argentina and to analyze the genetic diversity of the findings. DNAs extracted from 163 blood samples from dogs (40 from Buenos Aires city; 33 from Bahia Blanca, Buenos Aires; 15 from Castelli, Chaco; 27 from Salsipuedes, Córdoba; 40 from Merlo, San Luis; and 8 of San Miguel, Corrientes) were studied by PCR amplifying a variable fragment (460-540 bp) of the 18S rRNA gene including the V4 region of the genera Hepatozoon, Babesia and Theileria. Four dogs from Bahia Blanca (12.1%) were positive and the sequences obtained were identified as Hepatozoon canis and were phylogenetically similar to findings in South America and the rest of the world. The study of H. canis in Argentina with molecular methods together with phylogenetic analysis is important in order to know the situation of this pathogen in this country.

Aspectos anatomopatológicos em cães naturalmente infectados por Hepatozoon canis / Anatomopathological findings in dogs naturally infected by Hepatozoon canis

A hepatozoonose canina é causada principalmente pelos protozoários Hepatozoon canis e H. americanum, transmitida por ingestão de carrapatos parasitados. Os sinais clínicos podem ser inespecíficos ou de difícil reconhecimento, pois geralmente ocorre associada a outras doenças. No Brasil, o parasito, e a doença, já foram identificados em vários Estados, no entanto pouco se sabe sobre as alterações clínicas e anátomo-patológicas decorrentes da infecção. O presente trabalho relata cinco casos de infecções naturais por Hepatozoon canis em cães do Estado de Minas Gerais e descreve pela primeira vez no Brasil os achados de necropsias e histopatológicos relacionados à infecção. Merontes de Hepatozoon sp., submetidos a avaliação morfométrica, foram observados em cortes histológicos de fígado, baço, medula óssea e rim.(AU)

Canine hepatozoonosis is mainly caused by protozoa Hepatozoon canis and H. americanum that are transmitted by ingestion of infected ticks. Clinical signs may be unspecific or difficult to identify, because usually hepatozoonosis occurs associated with other disease. In Brazil, the parasite and the disease, have been identified in several states, however little is known about the clinical and anatomopathological lesions resulting from the infection. This paper reports five cases of natural infection by Hepatozoon canis in dogs from Minas Gerais State and describes for the first time in Brazil the necropsy and histopathological findings related to infection. Meronts of Hepatozoon sp., submitted to morphometric evaluation, were observed in histological sections of liver, spleen, bone marrow and kidney.(AU)

First Case of Canine Infection with Hepatozoon canis (Apicomplexa: Haemogregarinidae) in the Republic of Korea

This report describes a dog infected with Hepatozoon canis, the first canine infection in the Republic of Korea. A 2-year-old intact male Maltese dog presented with anorexia and depression. Physical examinations revealed mild dehydration and hyperthermia (39.8°C), and blood analysis showed pancytopenia. Diff-Quik staining of blood smear specimens showed the presence of ellipsoidal shaped structures (gamonts of H. canis) within a small number of neutrophils. Real-time PCR analysis using whole blood confirmed infection by H. canis. The clinical condition of the dog improved after symptomatic treatment and administration of doxycycline. Although a molecular epidemiologic survey in Korea showed H. canis infection of dogs, to our knowledge this is the first report of a dog infection in Korea molecularly shown to be H. canis.

Hepatozoon canis and Leishmania spp. coinfection in dogs diagnosed with visceral leishmaniasis / Coinfecção com Hepatozoon canis e Leishmania spp. em cães diagnosticados com leishmaniose visceral

Abstract This study describes the occurrence of dogs naturally co-infected with Hepatozoon canis and two Leishmania species: L. infantum or L. braziliensis. Four dogs serologically diagnosed with Visceral Leishmaniasis were euthanized. Liver and spleen samples were collected for histopathological analysis and DNA isolation. H. canis meronts were observed in tissues from all four dogs. H. canis infection was confirmed by PCR followed by sequencing of a fragment of 18S rRNA gene. Leishmania detection and typing was confirmed by ITS1' PCR-RFLP and parasite burden was calculated using ssrRNA quantitative qPCR. A DPP - Dual Path platform test was performed. One out (Dog #2) of four animals was asymptomatic. Dogs #1 and #4 were infected by L. infantum and were DPP test positive. Dogs #2 and #3 were infected by L. braziliensis and were DPP test negative. Furthermore, visceral dissemination was observed in Dogs #2 and #3, since L. braziliensis was detected in liver and spleen samples. The visceral dissemination of L. braziliensis associated with systemic signs suggested that this co-infection could influence the parasite burden and disease progression.

Resumo O presente estudo descreve a ocorrência de coinfecção com Hepatozoon canis e duas espécies de Leishmania (L. infantum ou L. braziliensis) em cães. Quatro cães sorologicamente diagnosticados com leishmaniose visceral foram eutanasiados. Amostras do baço e fígado foram submetidas à histopatologia e extração de DNA. Merontes de H. canis foram observados nos quatro cães. A infecção por H. canis foi confirmada por PCR e sequenciamento de um fragmento do gene 18S rRNA. A infecção por Leishmania e tipagem foram realizadas por PCR-RFLP do região intergênica ITS1. A carga parasitária foi calculada pela qPCR quantitativa baseada no gene ssrRNA. O teste DPP - Dual Path platform foi realizado. Apenas o Cão #2 era assintomático. Os cães #1 e #4 estavam infectados com L. infantum e foram positivos no DPP. Os cães #2 e #3 estavam infectados com L. braziliensis e foram negativos no DPP. Além disso, visceralização foi observada nos cães #2 e #3, nos quais L. braziliensis foi detectada em amostras de baço e fígado. A visceralização da L. braziliensis associada a sinais clínicos sistêmicos sugerem que esta coinfecção pode ter influenciado na carga parasitária e progressão da doença.

Hematological disorders detected in dogs infected by Hepatozoon canis in a municipality in Mato Grosso do Sul State, Brazil / Alterações hematológicas detectadas em cães infectados por Hepatozoon canis em um município do estado do Mato Grosso do Sul, Brasil

A retrospective review of hematological reports of nine dogs detected with Hepatozoon canis infection by microscopic examination of blood smears in a laboratory in the municipality of Dourados, Mato Grosso do Sul, Brazil was conducted. This study aimed to evaluate the hematological profile of these infected dogs, in addition to the occurrence of coinfections with other agents that infect blood cells, since studies concerning canine hepatozoonosis in Brazil are scarce and there are some divergences regarding H. canis infection that still require a resolution. The nine cases of H. canis infection were identified among all dogs examined at the studied laboratory in 2009 and 2010, with an occurrence of 7/1,192 (0.59%; 95% CI 0.15 - 1.02%) positive dogs in the first year and 2/1,313 (0.15%; 95% CI 0.02 - 0.55%) cases in 2010. The analysis of the hematological reports showed an occurrence of coinfection between H. canis and other agents in two (2/9; 22.22%; 95% CI 2.81 - 60.00%) dogs, one with E. canis and another with Babesia spp. (1/9; 11.11%; 95% CI 0.28 - 48.24%). Only the blood test of one dog had no alterations, based on reference values. Anemia was the most frequent hematological alteration (6/9; 66.67%; 95% CI 29.93 - 92.51%). Although the occurrence of H. canis infection was low, significative hematological alterations were observed in most infected dogs. Coinfection with Babesia spp. and E. canis was detected in two dogs and the hematological alterations cannot be attributed exclusively to H. canis in these animals. Longitudinal studies would be of fundamental importance to determine the causality of these alterations. These results highlight the importance of differential diagnosis in dogs when there is clinical suspicion of infection by hemoparasites, since the hematological changes in dogs infected by H. canis are quite variable.(AU)

Realizou-se estudo retrospectivo de laudos hematológicos de nove cães detectados com infecção por Hepatozoon canis, por meio de exame microscópico de esfregaços sanguíneos, em um laboratório no município de Dourados, Mato Grosso do Sul, Brasil. Este estudo objetivou avaliar o perfil hematológico dos cães infectados, além da ocorrência de coinfecções com outros agentes que infectam células sanguíneas, tendo em vista que estudos a respeito da hepatozoonose canina no Brasil são escassos e que existem algumas divergências a respeito da infecção por H. canis que ainda requerem esclarecimento. Os nove casos de infecção por H. canis foram identificados dentre todos os cães examinados no laboratório estudado, em 2009 e 2010, com uma ocorrência de 7/1.192 (0,59%; IC 95% 0,15 - 1,02%) cães positivos no primeiro ano e de 2/1.313 (0,15%; IC 95% 0,02 - 0,55%) em 2010. A análise dos laudos hematológicos dos nove cães evidenciou a ocorrência de coinfecção entre H. canis e outros agentes em dois (2/9; 22,22%; IC 95% 2,81 - 60,00%) desses cães, um deles com E. canis e outro com Babesia spp. (1/9; 11,11%; IC 95% 0,28 - 48,24%). Apenas o exame sanguíneo de um cão não evidenciou alterações, com base nos valores de referência. Anemia foi a alteração hematológica mais frequentemente observada (6/9; 66,67%; IC 95% 29,93 - 92,51%). Embora a ocorrência de infecções por H. canis neste estudo tenha sido baixa, alterações hematológicas significativas foram observadas na maioria dos cães infectados. Coinfecções com Babesia spp. e E. canis foram observadas em dois cães, não sendo possível atribuir exclusivamente a H. canis as alterações hematológicas detectadas nesses animais. Estudos longitudinais seriam fundamentais para determinar a causalidade dessas alterações. Os resultados ressaltam a importância de realizar diagnóstico diferencial em cães quando há suspeita clínica de infecção por hemoparasitas, uma vez que as alterações hematológicas em cães infectados por H. canis são bastante variáveis.(AU)

Hallazgo de Hepatozoon y otros hemotrópicos en caninos domésticos del municipio Sucre, estado Sucre, Venezuela / First discovery of Hepatozoon and other hemotropics in canine domestic of the Sucre municipality, Sucre State, Venezuela

Los hemotrópicos son entidades patológicas que afectan a caninos domésticos y salvajes, así como a humanos; su distribución geográfica es mundial. Con el objetivo de determinar la prevalencia de hemotrópicos en caninos domésticos de las comunidades Cancamure II, Guaranache I y Vega El Limón, de la parroquia San Juan, municipio Sucre, estado Sucre, Venezuela, se tomaron muestras sanguíneas a 65 caninos, de todas las edades, sin distinción de raza ni sexo, previo consentimiento informado de sus propietarios. Para el diagnóstico parasitológico se utilizó el examen directo, extendidos sanguíneos y de capa blanca teñidos con Hemacolor®, también se empleó la técnica de concentración de Knott modificada. De los 65 caninos estudiados, 39 resultaron positivos para hemotrópicos, representando una prevalencia de 60,00%. Entre los hemotrópicos encontrados, Ehrlichia canis resultó ser la especie más común en los caninos con una prevalencia de 89,70%, seguido por Anaplasma platys (10,20%), Dirofilaria immitis (7,70%) y Hepatozoon canis (2,60%). La comunidad más afectada por Ehrlichia canis fue Guaranache I con el 48,60% de los casos. Los valores hematológicos concordaron con lo esperado para cada hemotrópico; en el caso particular de la hepatozoonosis, el canino presentó una leucocitosis de 18,3x10(9)/L y linfocitosis leve (53,80%); sin embargo, no presentó ningún signo patognomónico. La elevada prevalencia de Ehrlichia canis en estas comunidades representa un riesgo epidemiológico para la población canina y las personas de estas comunidades. El hallazgo de Hepatozoon canis representa un importante aporte epidemiológico de la enfermedad en el municipio Sucre, siendo este el primer caso reportado en el oriente venezolano.

Hemotropics are pathogens that affect domestic and wild dogs as well as humans worldwide. In this study we determined the prevalence of hemotropics in domestic dogs in the Cancamure II, Vega El Limón and Guaranache communities in the parish of San Juan, Sucre Municipality, Sucre state, Venezuela. Blood samples of 65 dogs of all ages, regardless of race or sex, were collected with the informed consent of their owners. Parasitological diagnosis was performed using direct examination, as well as blood and buffy coat smears stained with Hemacolor®. The modified Knott´s concentration technique was also used. Of the 65 dogs studied 39 (60%) tested positive for hemotropics, and of these Ehrlichia canis was the most common species with a prevalence of 89.7%, followed by Anaplasma platys (10.2%), Dirofilaria immitis (7.7%) and Hepatozoon canis (2.6%). The community most affected by Ehrlichia canis was Guaranache with 48.6% of the total number of cases. Hematologic values were consistent with expected values for each hemotropic. As regards the hepatozoonosis, the dog showed a leukocytosis of 18.3x10(9)/L and mild lymphocytosis (53.8%), but did not show any pathognomonic symptoms. The high prevalence of Ehrlichia canis in these communities represents an epidemiological risk both for the dog populations and human inhabitants. The presence of Hepatozoon canis also represents an important contribution to the epidemiology of hepatozoonosis in Sucre Municipality, as this is the first report of this disease in eastern Venezuela.

Molecular identification of Hepatozoon canis in dogs from Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brazil / Identificação molecular de Hepatozoon canis em cães de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil

The aim of this study was to investigate the occurrence of Hepatozoon species infecting dogs in the municipality of Campo Grande, Mato Grosso do Sul (MS), Brazil, using blood samples (n = 165) drawn from dogs. The species Hepatozoon caniswas identified in 3.63% of the tested animals using molecular tools. Further studies are needed to determine the clinical relevance of this infection and the main arthropod vectors involved in its transmission.

O objetivo deste estudo foi identificar a frequência e espécies de Hepatozoon infectando cães no município de Campo Grande, Mato Grosso do Sul, Brasil. Uma amostragem de 165 animais foi utilizada e, por meio do uso de ferramentas moleculares, a espécie Hepatozoon canis foi identificada em 3,63% dos animais. Mais estudos são necessários para identificar a relevância clínica e os principais vetores envolvidos na transmissão desse protozoário na região.

Survey of Ehrlichia canis, Babesia spp. and Hepatozoon spp. in dogs from a semiarid region of Brazil / Pesquisa de Ehrlichia canis, Babesia spp. e Hepatozoon spp. em cães de uma região semiárida do Brasil

This study assessed the occurrence of Ehrlichia spp., Babesia spp. and Hepatozoon spp. infections in 100 tick-harboring dogs from a semiarid region of the State of Paraíba, Northeastern Brazil. Blood samples and ticks were collected from the animals, and a questionnaire was submitted to dog owners to obtain general data. Blood samples were used to perform hemogram, direct blood smear and immunological and molecular hemoparasite detection. The 1,151 ticks collected were identified as Rhipicephalus sanguineus; direct smears revealed E. canis-like morulae in the monocytes of 4% (4/100) of the non-vaccinated female dogs, and 34% and 25% of the dogs tested positive for Ehrlichia canis by indirect immunofluorescence assay (IFA) and polymerase chain reaction (PCR), respectively. Blood smear examination revealed Babesia-suggestive merozoites in the erythrocytes of 2% (2/100) of the animals. Babesia vogeli was detected by PCR in ten animals (10%) and was correlated with young age (p = 0.007) and thrombocytopenia (p = 0.01). None of the animals showed Hepatozoon spp. positivity. These results indicate that E. canis is the main tick-borne canine pathogen in the study area and provide the first report of B. vogeli infection in dogs from Paraiba State.

O presente estudo avaliou a ocorrência de infecção por Ehrlichia spp., Babesia spp. e Hepatozoon spp. em 100 cães, infestados por carrapatos, oriundos de uma região semiárida do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil. Amostras de sangue e de carrapatos foram coletadas dos animais, e um questionário foi submetido aos proprietários dos cães para obter dados gerais. As amostras de sangue foram utilizadas para realização de hemograma, esfregaço sanguíneo e detecção molecular dos hemoparasitos. Os 1.151 carrapatos coletados foram identificados como Rhipicephalus sanguineus; os esfregaços sanguíneos revelaram mórulas sugestivas de E. canis em 4% (4/100) de cães fêmeas não vacinadas, e 34% e 25% dos cães foram positivos para Ehrlichia canis pela imunofluorescência indireta (IFI) e reação em cadeia pela polimerase (PCR), respectivamente. Os esfregaços sanguíneos revelaram merozoítas sugestivas de Babesia em eritrócitos de 2% (2/100) dos animais. Babesia vogeli foi detectada por PCR em dez animais (10%) e foi correlacionada com a idade jovem (p=0,007) e trombocitopenia (p=0,01). Nenhum dos animais apresentou positividade para Hepatozoon spp. Esses resultados indicam que E. canis é o principal patógeno canino transmitido por carrapato, na área estudada, e fornece o primeiro relato de infecção por B. vogeli em cães do Estado da Paraíba.

Study on coinfecting vector-borne pathogens in dogs and ticks in Rio Grande do Norte, Brazil / Estudo da coinfecção por patógenos transmitidos por vetores em cães e carrapatos no Rio Grande do Norte, Brasil

Since dogs presenting several vector borne diseases can show none or nonspecific clinical signs depending on the phase of infection, the assessment of the particular agents involved is mandatory. The present study aimed to investigate the presence of Babesia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Hepatozoon spp. and Leishmania spp. in blood samples and ticks, collected from two dogs from Rio Grande do Norte showing suggestive tick-borne disease by using molecular techniques. DNA of E. canis, H. canis and L. infantum were detected in blood samples and R. sanguineus ticks collected from dogs. Among all samples analyzed, two showed the presence of multiple infections with E. canis, H. canis and L. infantum chagasi. Here we highlighted the need for molecular differential diagnosis in dogs showing nonspecific clinical signs.

Cães que apresentam diversas doenças transmitidas por vetores podem mostrar nenhum ou alguns sinais clínicos inespecíficos. Dependendo da fase da infecção, a confirmação dos agentes envolvidos é necessária. O presente estudo teve como objetivo detectar a presença de Babesia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Hepatozoon spp. e Leishmania spp. em amostras de sangue e carrapatos, coletados em dois cães do Rio Grande do Norte. Esses animais apresentavam sinais clínicos sugestivos de doenças transmitidas por carrapatos, quando foram usadas técnicas moleculares. DNA de E. canis, H. canis e L. infantum foram detectados em amostras de sangue e carrapatos R. sanguineus coletados dos cães. Entre todas as amostras analisadas, duas mostraram a presença de infecções múltiplas por E. canis, H. canis e L. infantum chagasi. Destaca-se a necessidade de um diagnóstico molecular diferencial em cães com sinais clínicos inespecíficos.

LA AYUDA DIAGNÓSTICA ES IMPORTANTE: CASO DE Hepatozoon spp. / THE DIAGNOSTIC AID IS IMPORTANT: A CASE OF Hepatozoon spp.

Hepatozoon canis es un protozoario transmitido por Rhipicephalus sanguineus que afecta a caninos domésticos principalmente, pero ha sido reportado en gatos, chacales, hienas, coyotes, leopardos, zorros e inclusive en el hombre. Ha sido reconocido en el sur de Europa, África, Asia, Norte América y Sur América, donde se ha reportado su presencia en Brasil y Venezuela. Se hace el reporte de un caso clínico en un canino proveniente del departamento de La Guajira que presenta historia clínica de anorexia, depresión, vómito, diarrea, fiebre e infestación por garrapatas al que le fue diagnósticado la presencia de gametocitos de Hepatozoon spp. en extendidos de sangre periférica, además de Ehrlichia canis por la detección de anticuerpos tipo IgG.

Hepatozoon canis is a protozoan transmitted by Rhipicephalus sanguineus that mainly affects domestic dogs, but that has been reported in cats, jackals, hyenas, coyotes, leopards, foxes and even in men. It has been recognized in southern Europe, Africa, Asia, North America and South America, where its presence has been reported in Brazil and Venezuela. The report of a case of a canine from the Department of La Guajira is done presenting a history of anorexia, depression, vomiting, diarrhea, fever, and tick infestation that was diagnosed by the presence of Hepatozoon spp. gametocytes in a peripheral blood smear plus IgG antibodies for Ehrlichia canis.

Diagnóstico de hepatozoon spp. en perros (Canis familiaris) y sus vectores en áreas rurales de los Estados Lara y Yaracuy-Venezuela / Diagnosis of hepatozoon spp. in dogs (Canis familiaris) and its vectors from rural areas of Lara and Yaracuy States, Venezuela

El objetivo de este trabajo fue diagnosticar Hepatozoon spp. en perros de áreas rurales en algunos municipios de los estados Lara y Yaracuy, así como su relación con los potenciales artrópodos vectores involucrados en su transmisión. Babesia canis vogeli, Ehrlichia canis y en menor frecuencia Hepatozoon canis son los agentes parasitarios más importantes en caninos teniendo todos ellos como vector a Rhipicephalus sanguineus. Estos hemotrópicos infectan frecuentemente a los animales sin causarles sintomatología clínica y en otros casos les causan enfermedad de gravedad variable. La asociación de estos agentes es muy común, lo que favorece la gravedad de los síntomas clínicos. Además de R. sanguineus, otros géneros de garrapatas pueden ser encontradas parasitando perros, como Amblyomma e Ixodes. Durante el estudio se realizaron frotis sanguíneos de sangre periférica de la oreja de 300 perros y se colectaron 604 garrapatas por medio de extracción manual. Estos ixódidos fueron identificados taxonómicamente en el Laboratorio de Parasitología con la ayuda de claves dicotómicas y luego fueron sometidas a disección en busca de fases evolutivas de Hepatozoon spp. Los resultados fueron analizados a través de estadísticas no paramétricas indicando la presencia o ausencia de Hepatozoon spp. y la identificación de los vectores involucrados. Se observó Hepatozoon spp. en las muestras de sangre periférica de 11 de los perros estudiados, correspondiendo a tres perros del estado Lara y ocho al estado Yaracuy. En relación a los vectores, se identificaron en el estado Lara, 557 Rhipicephalus sanguineus, 11 Amblyomma ovale y 10 Ixodes spp. y en el estado Yaracuy solamente se diagnosticaron 26 especímenes de Amblyomma ovale. Es importante destacar la presencia de Hepatozoon spp. en áreas rurales donde no se identificó R. sanguineus.

The purpose of this research was to diagnose Hepatozoon spp. in dogs from rural areas in some municipalities of the States of Lara and Yaracuy, Venezuela, and its relationship with potential arthropods vectors involved in its transmission. Babesia canis vogeli, Ehrlichia canis, and less frequently, Hepatozoon canis, are the most important hemoparasites of dogs, all having as a common vector Rhipicephalus sanguineus. These hemoparasites frequently infest both domestic and rural animals without overt clinical symptoms; in other cases, they cause diseases of varied severity. Coinfections by hemoparasites are very common, which favors the severity of clinical symptoms. Besides R. sanguineus, other tick genera like Amblyomma and Ixodes, can be found infesting dogs. To carry out this study, thin blood smears from peripheral ear veins of 300 dogs were performed; and 604 ticks were collected by manual extraction. These ixodids were taxonomically identified at the Parasitology Laboratory, with the help of dichotomous taxonomic keys. Then, they were subjected to dissections looking for evolutionary stages of Hepatozoon spp. Results obtained were analyzed through non-parametric statistics, showing the presence or absence of Hepatozoon spp. and the identification of the involved vectors. Hepatozoon spp. was found in samples of peripheral blood in 11 of the dogs studied, three from the State of Lara and eight from the State of Yaracuy. Regarding vectors, 557 Rhipicephalus sanguineus, 11 Amblyomma ovale and 10 Ixodes spp. were identified in Lara, whereas only 26 specimens of Amblyomma ovale were identified in Yaracuy. It is important to underscore the presence of Hepatozoon spp. in rural areas where R. sanguineus was not identified.

Molecular detection of feline arthropod-borne pathogens in cats in Cuiabá, state of Mato Grosso, central-western region of Brazil / Detecção molecular de patógenos transmitidos por artrópodes em gatos de Cuiabá, estado do Mato Grosso, centro-oeste do Brasil

Hemotrophic mycoplasmas (hemoplasmas), Bartonellasp., Hepatozoon sp. and Cytauxzoon felis are prominent pathogens that circulate between cats and invertebrate hosts. The present study aimed to detect the presence of DNA from hemoplasmas, Bartonella sp., Hepatozoon sp. and Cytauxzoon felis, and then confirm it by means of sequencing, in blood samples from cats in Cuiabá, MT, Brazil. From February 2009 to February 2011, blood samples with added EDTA were collected from 163 cats that were being housed in four different animal shelters in the city of Cuiabá, state of Mato Grosso, Brazil and from 15 cats that were admitted to the veterinary hospital of the Federal University of Mato Grosso (UFMT). Out of the 178 cats sampled, 15 (8.4%) were positive for hemoplasmas: four (2.2%) for Mycoplasma haemofelis, 12 (6.7%) for 'Candidatus M. haemominutum' and one (0.5%) for 'Candidatus M. turicensis'. One cat (0.5%), a patient that was attended at the veterinary hospital, was coinfected with M. haemofelis, 'Candidatus M. haemominutum' and 'Candidatus M. turicensis', based on sequencing confirmation. Four cats were positive for Bartonella spp.: three (1.7%) for B. henselae and one (0.5%) for B. clarridgeiae. None of the animals showed Cytauxzoon sp. or Hepatozoon sp. DNA in their blood samples. This study showed that cats housed in animal shelters in the city of Cuiabá, state of Mato Grosso, are exposed to hemoplasmas and Bartonella species.

Micoplasmas hemotróficos (hemoplasmas), Bartonellasp., Hepatozoon sp. e Cytauxzoon felis se destacam como importantes patógenos que circulam entre gatos e hospedeiros invertebrados. O presente estudo objetivou detectar e, posteriormente confirmar por seqüenciamento, a presença de DNA de hemoplasmas, Bartonella sp., Hepatozoon sp. e Cytauxzoon felis em amostras de sangue de gatos de Cuiabá, MT, Brasil. Entre fevereiro/2009 e fevereiro de 2011, amostras de sangue acrescidas de EDTA foram coletadas de 163 gatos mantidos em quatro diferentes abrigos na cidade de Cuiabá, estado do Mato Grosso, Brasil, e de 15 gatos atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Mato Grosso (UFTM). Dos 178 gatos amostrados, 15 (8,4%) foram positivos para hemoplasmas: quatro (2,2%) para Mycoplasma haemofelis, 12 (6,7%) para 'Candidatus M. haemominutum' e um (0,5%) para 'Candidatus M. turicensis'. Um (0.5%) gato, atendido no Hospital Veterinário da UFMT, estava co-infectado com M. haemofelis, 'Candidatus M. haemominutum' e 'Candidatus M. turicensis', baseado na confirmação por sequenciamento. Quatro gatos mostraram-se positivos para Bartonella spp.: três (1,7%) para B. henselae e um (0.5%) para B. clarridgeiae. Todos os gatos amostrados mostraram-se negativos para Cytauxzoon sp. e Hepatozoon sp. Este estudo mostrou que gatos mantidos em abrigos na cidade de Cuiabá, estado do Mato Grosso, são expostos a hemoplasmas e espécies de Bartonella sp.